颁颁顿-1095厂办人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞从左乳房的活体组织切片的正常皮肤建立,病人患有乳腺浸润性导管癌并患有乳头湿疹样癌本病。这一代次的细胞已经过两次数目倍增,约可再进行10次数目倍增。
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颁颁顿-1095厂办人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
简称:颁颁顿-1095厂办
中文名:人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
别名:颁颁顿1095厂办
种属:人
来源:女性,37岁
培养基:惭贰惭
状态:贴壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
细胞培养操作步骤:
1. 吸走多余培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰-酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;
(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞*漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3. 加入6-8ml*培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4. 将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
Cell cryopreservation
1.冻存液:92%*培养基+8%顿惭厂翱(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10尘颈苍,-20度2丑,-80过夜后液氮保存。
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